ENZO熱銷產品——FLUOR DE LYS® HDAC fluorometric activity assay kit組蛋白去乙酰化酶熒光活性檢測試劑盒

目前，組蛋白去乙酰化酶抑制劑已經顯示出其作為抗腫瘤藥物的前景，這也自然激發了研究者們對于篩選HDAC（Histone deacetylase，組蛋白去乙酰化酶）抑制化合物的興趣。Enzo的FLUOR DE LYS®HDAC熒光活性檢測試劑盒（貨號：BML-AK500-0001）是一種靈敏、便捷的組蛋白去乙酰化酶檢測試劑盒，可替代使用傳統的放射性標記的乙酰化組蛋白和肽/HPLC法檢測組蛋白去乙酰化酶的方案。

FLUOR DE LYS®去乙酰化酶檢測平臺是Enzo的升級酶活性檢測系列產品的基礎，其中的產品就包括用于篩選HDAC（組蛋白去乙酰化酶）活性調節劑和Sirtuin（長壽蛋白，一種去乙酰化酶）活性調節劑的試劑盒。Enzo還可提供基于熒光共振能量轉移（FRET）的試劑盒，用以檢測基質金屬蛋白酶（MMPs）和天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶（Caspase）的活性，以及提供基于磷酸特異性抗體的激酶檢測試劑盒。

這些檢測證明了Enzo在組裝小肽、合成活性重組蛋白、熒光標記和檢測技術，以及抗體開發等多方面協同的能力，也保障了Enzo能夠生產出功能強大且重復性好的檢測試劑盒。

Enzo的酶活性檢測試劑盒均具有以下特點：

高品質：高活性、高純度的重組酶，可呈現高質量的底物結合效果

靈活性：批量酶和底物可用于篩選后研究

強創新：多種readout 格式的專-利底物/顯影劑化學物質

作用機制：

FLUOR DE LYS® HDAC fluorometric activity assay kit基于Enzo特-有的 FLUOR DE LYS®（熒光法組蛋白去乙酰化酶-賴氨酸）底物和顯影劑組合，只需2步簡單的混合步驟，即可在同一個96 孔板上進行檢測。首先，將含有乙酰化賴氨酸側鏈的FLUOR DE LYS®底物與含有HDAC活性的樣品（HeLa核或其他提取物、純化酶、珠結合免疫復合物等）一起孵育。底物的去乙酰化會使底物增敏，所以在第二步中，將其與FLUOR DE LYS®顯影劑混合后會產生熒光團。

該檢測方法目前已經成功用于所有已知的I類HDAC——HDAC1、HDAC2、HDAC3和HDAC8（見產品數據表）和II 類HDAC 4-7、9和10，以及人類Sir2同源物和SIRT1（見產品數據表）的制備。Enzo Life Sciences的研究表明，FLUOR DE LYS®底物具有細胞滲透性，并可在原位被細胞HDAC去乙酰化。脫乙酰化的底物在細胞內積聚后，可通過向細胞裂解液中加入FLUOR DE LYS®顯影劑進行定量測定。

Figure 1. HDAC熒光活性檢測的反應方案。底物去乙酰化使其對顯影劑敏感，從而產生熒光團（symbol）。熒光團可被360 nm的光激發，并發射出460 nm的光，發射光在熒光平板閱讀器上可被檢測到。

產品特點：

使用提供的核提取物，有助于檢測裂解物、免疫沉淀物以及篩選抑制劑；

含有HeLa核提取物，作為HDAC 1和2的豐富來源，可用作陽性對照，也可用作篩選HDAC活性的來源；

與I & IIb類HDAC和Sirtuin兼容（添加NAD+）；

無放射性，沒有提取步驟；

所提供的試劑足夠分析100-200次。

產品信息：

產品引用文獻：

The activation of histone deacetylases 4 prevented endothelial dysfunction: A crucial mechanism of HuangqiGuizhiWuwu Decoction in improving microcirculation dysfunction in diabetes: M. Chen, et al.; J. Ethnopharmacol. 307, 116240 (2023), Abstract;

Four New Anthraquinones with Histone Deacetylase Inhibitory Activity from Ventilago denticulata Roots: N. Hangsamai, et al.; Molecules 27, 1088 (2022), Abstract;

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